农作物论文_玉米苗期响应低温胁迫的蛋白组学研
文章目录
摘要
英文摘要
1 前言
1.1 研究目的与意义
1.2 低温胁迫对玉米的危害
1.3 低温胁迫对玉米生长发育的影响
1.3.1 形态学指标和产量性状指标
1.3.2 生理生化指标
1.4 低温信号响应机制
1.4.1 低温胁迫信号感知
1.4.2 低温胁迫信号转导
1.5 蛋白质组学及其在植物抗低温响应中的应用
1.5.1 蛋白质组学概述
1.5.2 定量蛋白质组学的发展
1.5.3 蛋白质组学在植物抗低温研究中的应用
1.6 代谢组学及其在植物抗低温响应中的应用
1.6.1 代谢组学概述
1.6.2 代谢组学的发展
1.6.3 代谢组学在植物抗低温研究中的应用
1.7 技术路线图
2 材料与方法
2.1 玉米自交系抗冷性评价
2.1.1 实验材料
2.1.2 玉米生长条件
2.1.3 低温胁迫处理
2.1.4 相关指标测定
2.1.5 生理数据处理与统计方法
2.2 蛋白质组学分析
2.2.1 材料种植及胁迫处理
2.2.2 总蛋白的提取
2.2.3 总蛋白浓度测定
2.2.4 总蛋白酶解
2.2.5 TMT标记
2.2.6 LC-MS/MS质谱检测
2.2.7 数据库检索及定量
2.2.8 蛋白表达数据分析
2.2.9 qRT-PCR验证
2.3 代谢组学分析
2.3.1 实验种植及胁迫处理
2.3.2 代谢物的提取
2.3.3 液相色谱联合质谱分析
2.3.4 数据的预处理
2.3.5 差异代谢物筛选
2.4 外源ABA预处理实验
2.4.1 实验材料及生长条件
2.4.2 外源ABA预处理
2.4.3 相关指标测定
2.4.4 生理数据处理与统计方法
2.5 候选蛋白功能验证
2.5.1 候选蛋白ZmOCP3进化树分析
2.5.2 载体的构建
2.5.3 构建转基因植株
2.5.4 ZmOCP3亚细胞定位分析
2.5.5 ZmOCP3在低温胁迫条件下表达模式分析
2.5.6 低温胁迫及ABA处理下表型鉴定
2.5.7 IP-MS实验
3 结果与分析
3.1 玉米苗期不同时期抗冷性分析
3.1.1 一叶期抗冷性分析
3.1.2 三叶期抗冷性分析
3.1.3 玉米苗期一叶期和三叶期抗冷性比较
3.2 TMT标记定量蛋白质组学分析
3.2.1 样品前处理及质控
3.2.2 质谱数据前处理
3.2.3 差异蛋白功能分析
3.2.4 权重基因共表达网络分析(WGCNA)
3.2.5 q RT-PCR验证分析
3.3 代谢组学分析
3.3.1 质量控制(QC)相关性分析
3.3.2 总体样本正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)
3.3.3 差异代谢物筛选
3.3.4 内源ABA含量相对变化
3.4 ABA预处理分析
3.4.1 一叶期ABA预处理分析
3.4.2 三叶期ABA预处理分析
3.4.3 相对变化及表型分析
3.5 候选蛋白功能验证
3.5.1 ZmOCP3同源性分析
3.5.2 目的基因ZmOCP3的克隆
3.5.3 转基因材料的验证
3.5.4 ZmOCP3蛋白亚细胞定位分析
3.5.5 ZmOCP3表达分析
3.5.6 ZmOCP3的表型分析
3.5.7 ZmOCP3互作蛋白筛选
4 讨论
4.1 玉米苗期低温胁迫
4.2 玉米苗期低温胁迫定量蛋白质组学
4.3 差异表达蛋白功能分析
4.4 外源适量ABA提高玉米抗低温能力
4.5 ZmOCP3抗低温功能鉴定
文章来源:《低温工程》 网址: http://www.diwengongcheng.cn/qikandaodu/2022/0204/727.html